 ПОЗНАВАТЕЛЬНОЕ Сила воли ведет к действию, а позитивные действия формируют позитивное отношение Как определить диапазон голоса - ваш вокал Игровые автоматы с быстрым выводом Как самому избавиться от обидчивости Противоречивые взгляды на качества, присущие мужчинам Вкуснейший "Салат из свеклы с чесноком" Натюрморт и его изобразительные возможности Применение, как принимать мумие? Мумие для волос, лица, при переломах, при кровотечении и т.д. Как научиться брать на себя ответственность Зачем нужны границы в отношениях с детьми? Световозвращающие элементы на детской одежде Как победить свой возраст? Восемь уникальных способов, которые помогут достичь долголетия Классификация ожирения по ИМТ (ВОЗ) Глава 3. Завет мужчины с женщиной
Оси и плоскости тела человека - Тело человека состоит из определенных топографических частей и участков, в которых расположены органы, мышцы, сосуды, нервы и т.д.
| Колориметрический динитрофенилгидразиновый метод определения активности лактатдегидрогеназы в сыворотке крови (по Севелу и Товареку).
Принцип метода. L-лактат в щелочной среде в присутствии ЛДГ сыворотки и добавленного НАД окисляется в пируват. По степени его образования и судят об активности фермента. Ход работы. 0,1 мл сыворотки, разведенной 1:2, смешивают с 0,3 мл раствора НАД и прогревают 5 мин при 37°С. Затем добавляют 0,8 мл раствора пирофосфорнокислого натрия и 0,2 мл раствора молочнокислого натрия, предварительно прогретых при 37°С. Смесь инкубируют при 37°С в течение 15 мин. Тотчас же после инкубации в пробу доливают 0,5 мл раствора 2,4-динитрофенилгидразина и выдерживают ее 20 мин при комнатной температуре. Затем вносят 5 мл раствора едкого натра, содержимое пробирки перемешивают и через 10 мин измеряют абсорбцию в области длин волн 500—560 нм, например на ФЭКе с зеленым светофильтром в кювете с толщиной слоя 10 мм. Регистрируют показатели оптической плотности исследуемой пробы, учитывая абсорбцию контрольной. Контрольную пробу ставят так же, как опытную, но разведенную 1:2 сыворотку добавляют после инкубации смеси. Рассчитывают активность фермента по калибровочному графику. Активность лактатдегидрогеназы выражают в ммоль пировиноградной кислоты, образовавшейся при инкубации 1 л сыворотки в течение 1 ч при 37°С. Нормальные величины активности общей ЛДГ в сыворотке крови — от 0,8 до 4 ммоль/ч • л. Выводы. Записать полученный результат и дать его клинико-диагностическую оценку.
Клинико-диагностическое значение определения общей активности ЛДГ В связи с тем, что фермент ЛДГ содержится практически во всех тканях, констатация повышения общей активности лактатдегидрогеназы не имеет большого значения для дифференциальной диагностики заболеваний внутренних органов. Повышение активности лактатдегидрогеназы. Активность ЛДГ в сыворотке крови возрастает у больных, страдающих анемией (гемолитической, пернициозной, мегалобластной, серповидно-клеточной), обширным карциноматозом, опухолями, лейкозами, лимфомой, вирусным и невирусным гепатитом, обтурационной желтухой, циррозом печени, различными заболеваниями почек, опорно-двигательного аппарата, инфарктом миокарда и легкого, а также при любом другом повреждении клеток, приводящем к цитолизу и утрате цитоплазмы (этот фермент, широко представленный в тканях организма, легко переходит в плазму крови при некробиотических процессах в клетках). При остром гепатите активность лактатдегидрогеназы в сыворотке крови увеличена в первые недели желтушного периода. Активность энзима значительно повышается при разнообразных формах хирургической патологии, сопровождающихся шоковым состоянием, выраженной гипоксией, декомпенсацией сердечно-сосудистой деятельности. У больных инфарктом миокарда активность фермента в сыворотке крови повышалась через 8—10 ч после начала приступа, достигая максимума через 24—28 ч, оставалась увеличенной на протяжении первой недели заболевания, нормализуясь к 8—9-м сут. Характерно, что общая активность сывороточной ЛДГ у больных инфарктом миокарда сохранялась повышенной вдвое дольше, чем активность других ферментов. Ценность данного теста особенно велика в неясных случаях заболевания, при нетипичной клинической и электрокардиографической картине инфаркта миокарда. У больных со стенокардией активность ЛДГ в сыворотке крови не увеличивалась. Общая активность ЛДГ у больных острым крупноочаговым инфарктом миокарда значительно повышалась уже в 1-е сут заболевания. Максимальный уровень ЛДГ (превышающий норму в 4—5 раз) наблюдался на 2-е сут, активность фермента оставалась высокой на 3-й, 4-е и 7-е сут, даже на 15-е сут заболевания она была достоверно выше, чем в контрольной группе. Установлена достоверная прямая корреляционная связь между размером очага омертвения в миокарде и общей активностью ЛДГ. Исследование общей активности ЛДГ имеет не только диагностическое, но и прогностическое значение. При мелкоочаговом инфаркте миокарда сдвиг активности ЛДГ умеренный. При высоком уровне ЛДГ следует опасаться неблагоприятного исхода заболевания, так как это обычно свидетельствует о наличии обширного, нередко трансмурального инфаркта миокарда. Следует отметить, что увеличение общей активности ЛДГ наблюдается не только при остром инфаркте миокарда, но также гемолизе любого происхождения (in vivо и in vitrо), анемии (гемолитической, пернициозной, серповидноклеточной, мегалобластной), остром некрозе почек. При желчнокаменной болезни без обтурации желчных ходов повышения активности ЛДГ не отмечено, тогда как у больных обтурационной желтухой на почве новообразования, билиарным циррозом, с опухолями поджелудочной железы она резко увеличена. То же наблюдается при желчном перитоните, когда в патологический процесс вовлекается печень. К увеличению общей активности ЛДГ приводит прием алкоголя, кофеина, введение анаболических стероидов, тестостерона, обезболивающих препаратов, дикумарина, хинидина, сульфаниламидов, кодеина, клофибрата, мисклерона. Снижение активности лактатдегидроганазы. Существует две группы причин, обусловливающих снижение активности фермента в крови и тканях. Одна из них связана с наличием ингибитора в сыворотке (плазме) крови, вторая — с генетическими нарушениями. Действительно, в сыворотке крови даже практически здоровых взрослых людей существует термозависимый ингибитор, присутствие которого снижает активность ЛДГ. При исследовании 20 000 образцов сыворотки крови выявлено 42 случая низкой активности ЛДГ. В качестве ингибиторов активности фермента крови выступают IgG, IgА, IgM. Уменьшение активности ЛДГ вызывают оксалаты (используемые в качестве антикоагулянтов) и мочевина. Лабораторная работа № 3. |
